色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，結合色譜及質(zhì)譜的技術(shù)，是目前分離和鑒定的重要的分析方法之一。其中液相色譜-質(zhì)譜儀應用更為廣泛，液相色譜除了能分析一般的化合物，還能分析氣相色譜不能分析的強極性、熱不穩定性、難揮發(fā)的化合物。液相色譜質(zhì)譜儀由色譜儀、接口、質(zhì)譜儀、電子系統、記錄系統和計算機系統六大部分組成，是一種的檢測儀器，儀器的良好工作狀態(tài)是檢測準確度的一個(gè)重要影響因子。為了保證儀器有一個(gè)良好的狀態(tài)，保證檢測結果的可靠性，需要正確合理的使用和維護儀器。下面以液相色譜儀為例，從儀器進(jìn)樣系統、色譜柱系統等各個(gè)系統的日常維護保養進(jìn)行詳細闡述，并對使用過(guò)程中容易遇到的問(wèn)題進(jìn)行分析，提出解決方法。

安捷倫液相色譜儀1260

　　液相部分的維護

　　開(kāi)機注意事項

　　要求使用220?V單相交流電。如發(fā)生斷電，不管任何原因造成的，先關(guān)閉儀器面板左下角的開(kāi)關(guān)，等待供電恢復10分鐘以上再開(kāi)啟電源，否則有可能燒毀電路板。儀器運行時(shí)需提供純度>99%的氮氣作為噴霧與干燥氣，輸出壓力為0.6～0.7?MPa。實(shí)驗開(kāi)始前先檢查液氮罐液體存量是否充足。儀器開(kāi)機時(shí)，確認電源已經(jīng)連接而且氣振閥處于關(guān)閉，打開(kāi)儀器總電源，隨后將前面板左下方的電源按鍵按下，真空泵即開(kāi)始工作。大約2～3分鐘后，儀器內置的系統啟動(dòng)完畢，可以開(kāi)啟Mass hunter軟件與儀器通訊。等待四極桿溫度達到100℃，高真空達到4×10-5??Torr之后，即可進(jìn)行調諧或開(kāi)始實(shí)驗。在儀器開(kāi)始抽真空時(shí)，請不要打開(kāi)前級泵上的氣振閥，否則可能因為回油污染真空腔體內部。

　　流動(dòng)相的要求

　　每次開(kāi)機前，保證超純水和流動(dòng)相的新鮮，泵的各個(gè)管路不應余留上次殘留的溶劑。流動(dòng)相需符合HPLC與LC-MS要求等級，流動(dòng)相中盡量加易揮發(fā)的鹽，盡量不使用表面活性劑之類(lèi)，否則容易導致離子抑制，表面活性劑產(chǎn)生的加合物和離子簇會(huì )干擾質(zhì)譜數據。如果遇到離子抑制，可以把樣品峰往后推或者改變提取方法，或者考慮用APCI源。盡量不使用無(wú)揮發(fā)性的緩沖劑，例如，磷酸緩沖劑等，磷酸鹽及其他不揮發(fā)緩沖鹽在離子源會(huì )沉淀并堵塞毛細管等。另外液質(zhì)不能承受過(guò)大流速。溶劑瓶避免陽(yáng)光直射。

　　樣品的要求

　　保證樣品的清潔，進(jìn)樣前盡量使用0.22?µm的濾膜濾過(guò)，避免樣品太臟而堵塞色譜柱或離子源的毛細管;樣品溶劑必須是色譜純，應該和流動(dòng)相比例一致;進(jìn)樣濃度不宜太高，因為太高濃度的樣品容易污染靈敏度高的儀器，進(jìn)而影響檢驗結果。由于液質(zhì)的流速較小(ESI一般為0.2?mL/min)，所以配置樣品的溶劑強度不能太大，盡量小于起始比例，否則，會(huì )出現保留時(shí)間偏移、峰形扭曲等問(wèn)題。

　　進(jìn)樣系統的維護

　　對于液相色譜來(lái)說(shuō)，無(wú)論是手動(dòng)進(jìn)樣還是自動(dòng)進(jìn)樣，都是使用六通閥進(jìn)樣的。進(jìn)樣裝置要求：密封性好，死體積小，重復性好，保證中心進(jìn)樣，進(jìn)樣時(shí)對色譜系統的壓力、流量影響小樣。六通閥使用及維護注意事項：①樣品溶液進(jìn)樣前必須用0.45?µm濾膜過(guò)濾，以減少微粒對進(jìn)樣閥的磨損。②轉動(dòng)閥芯時(shí)不能太慢，更不能停留在中間位置，否則流動(dòng)相受阻，使泵內壓力劇增，甚至超過(guò)泵的限值壓力;再轉到進(jìn)樣位時(shí)，過(guò)高的壓力將使柱頭損壞。③為防止緩沖鹽和樣品殘留在進(jìn)樣閥中，每次分析結束后應沖洗進(jìn)樣閥。通?？捎盟疀_洗，或先用能溶解樣品的溶劑沖洗，再用水沖洗。注意：溶劑入口過(guò)濾芯為消耗品，尤其不可以使用超聲清洗，可以使用稀硝酸浸泡，然后用水沖洗至中性，以重復使用。

    色譜柱系統的維護

　　在色譜操作過(guò)程中，需要注意下列問(wèn)題：①色譜柱的選擇會(huì )直接影響混合物中組分的分離，所以一定要選用合適的色譜柱，在使用新柱前要在自己的液相色譜儀上進(jìn)行性能測試，即使用色譜柱附帶的檢驗報告上測試條件和樣品來(lái)測定該色譜柱的柱效，并且在以后的使用中，應時(shí)常對色譜柱進(jìn)行測試。②柱子在使用過(guò)程中，不能碰撞、彎曲或強烈震動(dòng);避免壓力和溫度的急劇變化，機械震動(dòng)和溫度的突然變化都會(huì )影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì )沖動(dòng)柱內填料，因此在調節流速時(shí)應該緩慢進(jìn)行。③當柱子和色譜儀聯(lián)結時(shí)，閥件或管路一定要清洗干凈，樣品前處理對于柱子使用壽命影響甚大，進(jìn)樣樣品要提純過(guò)濾并且嚴格控制進(jìn)樣量，可以使用保護柱。④注意色譜柱的pH值使用范圍，不能高溫下過(guò)長(cháng)時(shí)間使用硅膠鍵和相;每天分析工作結束后，都要用適當的溶劑來(lái)清洗柱子。若分析柱長(cháng)期不使用，應用適當有機溶劑保存并封閉。