紫外檢測器是液相色譜儀zui常用的檢測器,目前市場(chǎng)上生產(chǎn)廠(chǎng)家及型號很多,廠(chǎng)家通常采用檢測器的噪音,基線(xiàn)漂移等技術(shù)參數作為產(chǎn)品的靈敏度性能評價(jià)指標??紤]到樣品的紫外吸收響應值主要與樣品有關(guān),與儀器的關(guān)系不大,一般認為這可以基本反映儀器在靈敏度方面的性能。
本文在實(shí)驗的基礎上證明對同一樣品各檢測器的響應值實(shí)際上也存在不同程序的差異,說(shuō)明僅使用噪音和基線(xiàn)漂移的指標不能準確顯示儀器在靈敏度方面的性能差異,因此,提出用信噪比來(lái)評價(jià)儀器的靈敏度性能。
1.靈敏度評價(jià)指標設置的目的和依據
液相色譜及其紫外檢測器主要用于化學(xué)樣品的分析測試。其評價(jià)指標必然與其用途相關(guān)聯(lián)。一個(gè)分析方法對檢測器的要求主要在靈敏度、選擇性、度和準確性方面。在色譜分析中靈敏度是非常重要的指標。對于靈敏度,在分析測試方法研究中主要使用信噪比、zui低檢測限,或zui低定量限來(lái)評價(jià)。其中信噪比是評價(jià)的核心,因為zui低檢測限和zui低定量限通常用信噪比在2~3和10的量來(lái)定義。
但目前廠(chǎng)家通常采用檢測器的噪音,基線(xiàn)漂移等技術(shù)參數作為產(chǎn)品的靈敏度性能評價(jià)指標。這實(shí)際上是基于樣品的紫外吸收響應值主要與樣品有關(guān),與儀器關(guān)系不大的假設。根據朗伯比爾定律,對于同樣長(cháng)度的檢測池,同樣濃度的樣品溶液應該具有相同的吸光度。這樣,對同樣濃度的樣品溶液,檢測器的響應值應該是相同的,所以上述噪音,基線(xiàn)漂移的參數應該可以用來(lái)評價(jià)檢測器的靈敏度性能。
但是,實(shí)驗中發(fā)現,同一樣品溶液在不同檢測器中響應實(shí)際上存在明顯差異,表1顯示對于同一種樣品溶液,不同廠(chǎng)家和型號檢測器的響應值可能相差3倍以上。這時(shí),由于色譜分析主要使用相對比較的間接測定方法,其使用實(shí)際上并沒(méi)有受到多少影響。難以簡(jiǎn)單認定儀器存在問(wèn)題。但因為信噪比發(fā)生了變化,上述噪音、基線(xiàn)漂移的參數就不能用來(lái)評價(jià)檢測器的靈敏度性能了。
此時(shí),直接使用信噪比來(lái)評價(jià)檢測器的靈敏度性能才是可靠和準確的方法。
2. 信噪比指標評價(jià)方法
評價(jià)信噪比需要測定響應值,需要選定樣品,推薦萘和L-苯丙氨酸等在254nm附近有吸收的樣品,前者常用于色譜柱性能評價(jià);后者無(wú)毒,且對儀器可能存在的偏振現象敏感。當然,即使使用不同的評價(jià)樣品,只要固定濃度和溶劑,也可以用分光光度計來(lái)校正和比較。
根據現有信噪比測定方法,在選定特定濃度的樣品后,先在選定波長(cháng)平衡檢測器(此時(shí)檢測器中的溶液為溶解評價(jià)樣品的溶劑),待基線(xiàn)穩定后,將配制好的樣品溶液直接灌注到儀器的流路并充滿(mǎn)其中,注意不要灌入氣泡,信號穩定后再用溶劑將樣品溶液沖出來(lái)。測定基線(xiàn)上下波動(dòng)的幅度為噪音值(N),測定基線(xiàn)中值與樣品信號中值的差為信號值(S)。則信噪比為兩者的比值(SN)。
3. 結 論
使用信噪比(SN)指標評價(jià)檢測器,可以更準確全面地評價(jià)各種檢測器的靈敏度性能。評價(jià)時(shí)可以參考現有的信噪比測定方法,建議用254nm作為檢測波長(cháng),選擇簡(jiǎn)單易得的樣品,濃度值的選定應使信噪比SN的值在10以?xún)?,以方便測量。配制特定濃度的評價(jià)溶液后,以灌注法測定此時(shí)相對溶劑的響應值S,測定和計算出信噪比SN的值,作為該檢測器對特定評價(jià)樣品溶液的信噪比評價(jià)指標的值。